大腸桿菌發酵罐噬菌體污染是一個需要引起重視的問題。噬菌體是一種能夠感染和裂解細菌的病毒,對大腸桿菌等細菌具有較高的感染力。在發酵過程中,如果大腸桿菌受到噬菌體的感染,會導致菌種污染、發酵異常、品質下降等問題,從而影響產品質量和產量。
噬菌體是一種由核酸和蛋白質外殼組成的病毒,具有高度的宿主特異性,只能感染特定的細菌。噬菌體在感染細菌后,會利用細菌的代謝系統復制自身的遺傳物質,并合成新的噬菌體顆粒。當細菌被大量噬菌體感染后,會導致細菌破裂死亡。
在大腸桿菌發酵過程中,如果存在噬菌體污染,將會對發酵過程產生嚴重影響。首先,噬菌體的感染會導致大腸桿菌生長受到抑制,發酵液的光密度不上升或回降。其次,噬菌體的感染會導致pH逐漸上升,因為細菌死亡后會產生大量的酸性物質。此外,噬菌體的感染還會導致氨利用停止、糖耗減少或停止、發酵周期延長等問題。
1.1專一的寄生性。噬菌體只能在專一的宿主細胞中生長繁殖,只能在活的、處于繁殖階段的細胞中生長繁殖,不能脫離宿生而自行生長繁殖。如果不同菌株的親緣關系比較近,那么此菌株也是會感染的,特別是針對長期生產同一產品的發酵工廠要特別注意,在換新菌株之前必須了解其背景。
1.2不耐熱性。游離的噬菌體在45℃條件下10min就可使其失活。
1.3不耐藥性。直接在噬菌體上噴灑1%新潔爾滅、75%酒精、1%雙氧水、5%的甲醛等都可使其失活。
2.1發酵液光密度開始上升,而后下降。但有時也不上升,當把1%的噬菌體人為的接入罐中,光密度始終處于低位 ;
2.2 pH逐漸上升,一般升到7.5,不再下降 3.3耗糖、氨緩慢或停止 3.4 OD回升
2.4鏡檢時發現菌體減少,發胖,革蘭氏染色后呈現紅色碎片。嚴重時,可出現拉絲或網狀,或呈魚刺狀,幾乎看不到完整菌體;
2.5用含有噬菌體的發酵液點在平板上能看到噬菌斑。
1、原料或IPTG受到了噬菌體的污染,菌株存在溶原性;
2、發酵車間環境里噬菌體隨空氣進入發酵罐污染,雖然發酵罐有空氣過濾器,但是如果環境空氣存在噬菌體,空氣過濾器是無法過濾攔截的,從空氣過濾原理得知只能攔截一部分的噬菌體。實踐證明,用過濾器的洗脫液經電鏡觀察,可以看到噬菌體的存在。
3、罐體、管道清洗消毒不到位,或時間久了存在管道頑固性生物膜給予的再次污染,溫度、藥物固然能滅活噬菌體,可是總有概率存活,并不是說達到一定的滅活溫度就一定能把全部殺滅,空氣加熱也不盡其然。
4、車間管理的疏忽大意,認為發酵只是發酵車間的事情與其他無關,其實預防噬菌體必須人人參與,提高意識,各部門配合且長期堅持下去。
四、為了預防大腸桿菌發酵罐中的噬菌體污染,可以采取以下措施:
選擇高品質的菌種和培養基,確保它們不含有噬菌體或其他污染物。
加強衛生管理,定期對發酵設備進行清洗和消毒,確保設備表面和內部沒有殘留物和雜菌。
在生產過程中注意使用適量的抗噬菌體劑,以預防噬菌體污染。
定期對發酵液進行檢測,包括噬菌體的檢測。一旦發現噬菌體污染跡象,立即采取措施進行控制和處理。
蒸汽滅菌是一種常見的發酵罐滅菌方法,它利用高溫高壓的蒸汽對發酵罐內壁和內部物料進行滅菌處理,這個過程可以有效殺滅各種細菌、真菌、病毒等微生物。
滅菌效果好、速度快、操作簡單。理論上,它可以有效殺滅各種細菌、病毒和真菌,包括難以滅活的芽孢菌。同時,由于蒸汽可以充分地滲透或熱傳導到物品內部,因此可以對各種形狀和大小的物品進行滅菌處理,包括液體、固體和氣體等。
蒸汽滅菌要求發酵罐材質和內部物料能耐受蒸汽,有一定操作彈性、內部附件盡量減少(避免死角)、物料與能量傳遞性能強,并可進行一定調節以便于清洗、減少污染,所以一旦上述方面出現問題就會在一定程度上影響最終的滅菌效果。另外,即使是發酵罐是采用蒸汽高溫殺菌,但在實際生產中也偶爾出現滅菌失敗的情況——尤其是常出現耐熱芽孢、噬菌體導致的滅菌失敗。
1) 廣譜型殺菌,一種產品就能全面殺滅細菌、真菌等,包括芽孢、噬菌體、耐熱菌、霉菌、雜菌等各種類型微生物。
2) 有效應對高抗性微生物污染,高數量等級微生物污染。
3) 多用途,適用于發酵車間環境、管道、發酵罐、水處理系統等等各環節的消毒殺菌工作。
4) 食品級生態型,產品性狀為無色無味的透明液體,作用完畢后分解為水和氧氣。
5) 良好的材料兼容性,基本無腐蝕,保護設備材料。
6) 來自德國,提供德國和歐盟先進的微生物控制理念。
7) 相關案例支持,擁有豐富的微生物處理經驗8) 根據現場具體的微生物狀況,提供科學針對性的解決方案。
總之,大腸桿菌發酵罐中的噬菌體污染是一個需要引起重視的問題。通過采取有效的預防措施和控制方案,可以減少噬菌體污染的風險,確保發酵過程的順利進行和產品的安全性。同時,對于已經受到噬菌體污染的發酵罐,需要及時采取處理措施,以避免對生產過程和產品造成更大的影響。
需要注意的是,噬菌體的種類繁多,不同的噬菌體對不同種類的細菌具有不同的感染力和致病力。因此,在實際生產中,需要根據具體情況采取針對性的控制措施和治療方案。此外,隨著科技的不斷進步和創新,未來可能會有更多的新方法和技術用于預防和處理大腸桿菌發酵罐中的噬菌體污染問題。